ЛАБ Молоко
Работа анализатора Lactoscan SCC (второе название для Российского рынка Эксперт ССК) основан на методе флуоресцентного микроскопического подсчета клеток. Благодаря флуоресцентному красителю, светодиодной оптике и технологии CCD для создания снимков данный анализ соматических клеток в молоке является точным, надежным и быстрым. А метод флуоресцентной микроскопии признан арбитражным.
Для того чтобы подсчитать соматические клетки на приборе Lactoscan SCC (Эксперт ССК), пробу молока смешивают с краской SOFIA GREEN в специальных кассетах. Необходимо только 8 мкл подготовленного образца для заполнения его пипеткой в одноразовую кассету. Затем кассету загружают в устройство. Продолжительность анализа составляет от 10-ти секунд до 2-х минут, в зависимости от количества производимых снимков. Lactoscan SCC (Эксперт ССК) автоматически фокусируется на кассете и окрашенные клетки улавливаются чувствительной CCD камерой. Алгоритм анализа цифрового изображения включает определение количества флуоресцентных клеток и расчет их концентрации и размеров. Результат отображается автоматически. Данный анализатор позволяет:
- определять количество соматических клеток. Причём делать это дифференцировано: по размеру клетки, по типу. А это в свою очередь позволяет отделять субклинический мастит от дрожжевого, что в последствии избавит животное от излишнего медикаментозного лечения антибиотиками и положительно скажется на сортности молока, а значит и его цене.
- проводить ветеринарный анализ проб
- настраивать программное обеспечение на выявление сортового/не сортового молока, превышение уровня соматических клеток
- осуществлять визуальный контроль по полученным снимкам на экране анализатора – определять разновидность мастита
Сущность метода. Его преимущества.
Большинство предприятий в настоящее время применяет вискозиметры для контроля количества соматических клеток. Однако исследования ГНУ “ВНИИМС РАН” в г. Углич показали, что на значения вискозиметров большое влияние оказывает фальсификация молока сырого как химическими веществами, так и путём воздействия температурой:
- добавление в молоко перекиси водорода, мочевины, соды и других веществ, используемых для фальсификации тех или иных показателей молока-сырья, приводит к прямо пропорциональному снижению значений вискозиметра в зависимости от их концентрации;
- любое нагревание молока до температур термизации или пастеризации приводит к сбою показаний прибора и вискозиметр показывает значения менее 90 тыс. клеток в 1см3 молока независимо от их истинного содержания.
Эти особенности необходимо учитывать при анализе полученных результатов. Опыт работы многих предприятий свидетельствует о том, что при контроле соматических клеток в молоке с использованием вискозиметра в журналах фиксируется значения менее 90 тыс. в 1см3, которые специалисты, принимающие молоко на предприятии, считают нормой и относят данное молоко к высшему сорту. Такие выводы являются очень опасным заблуждением, так как в норме для сборного молока показатель соматических клеток менее 200 тыс. в 1см3 у стада на территории РФ не наблюдается. Чтобы получить такой уровень соматических клеток в сборном молоке, необходимо иметь стадо перводоек в первые 3-4 мес. после лактации. А это, согласитесь, “большая” редкость…
Таким образом, если стоит задача точно, с погрешностью не более 2-5%, определить количество соматических клеток, то остаётся два метода: “Микроскопический” – прямой подсчёт с использованием микроскопа и “Флуоресцентный” – по сути это тот же Микроскопический метод, поскольку также применяется краситель и автоматический микроскоп, результаты которого обрабатывает встроенный компьютер по средствам программного обеспечения.
Микроскопический метод сопряжён с применением опасных материалов, требует специального оснащения оборудованием. Подготовка и профессиональные навыки микробиолога являются основными решающими факторами использования данного метода. А время проведения самого анализа составляет не менее 3-4 часов. Данный метод может быть реализован только в условиях специализированных лабораторий. Метод крайне трудоёмкий, а время проведения одного анализа составляет не менее 3-4 часов.
Однако метод прямого микроскопирования является единственным прямым методом контроля, позволяющим увидеть, идентифицировать и сосчитать соматические клетки в молоке. Поэтому именно он был взят за основу и модифицирован с флуоресцентным методом при разработке анализатора Lactoscan SCC (Эксперт ССК).
Суть в следующем: лизогенный буфер, находящийся на стенках пробирки, разрушает цитоплазматическую мембрану соматической клетки – при этом ядра клеток становятся доступными для действия флуоресцентного красителя. Краситель связывается с двуспиральной ДНК соматических клеток и образует флуоресцентное вещество, позволяющее идентифицировать клетки. Встроенный компьютер даёт изображение клеток, а программное обеспечение подсчитывает их количество.
В отличие от классического микроскопического метода подсчёта соматических клеток, в данном методе имеется целый ряд преимуществ: увеличение при анализе(4 крата), высокая воспроизводимость результатов, возможность проведения анализов, как в стационарных, так и в полевых условиях. Низкая себестоимость анализа( от 7-10 рублей) и короткое время анализа(от 15 секунд). Не требуется дополнительная пробоподготовка образцов и специальные навыки для лаборанта: Вы просто берёте набор кассет и краситель, который идёт в комплекте и образцы молока для исследования. Всё.
В настоящее время данный метод реализован массово только в анализаторе Delaval DCC, Швеция. Этот прибор давно используется в России, зарекомендовал себя, как надёжный и простой в обращении прибор для сырого коровьего молока. Один анализ – одна кассета. Стоимость кассеты, в среднем на Российском рынке составляет 2-2,5 евро, что в рублях около 150 рублей за 1 анализ. При анализе делается одна фотография.
И напротив, стоимость одного анализа Lactoscan SCC (Эксперт ССК) составляет порядка 29 рублей, поскольку каждая кассета рассчитана на 4 измерения. Работать он может с различными типами молока: коровье, козье, овечье – как сырое, таки консервированное. При анализе каждый из четырёх сегментов кассеты делится от 4 до 32 фрагментов и на каждом делается фотография. Точность колоссальная!
Широкие возможности этого прибора позволяют не только узнать количество соматических клеток в конкретной пробе молока, но и посмотреть фотографии этих клеток под увеличением до 500 раз; проанализировать и построить график распределения по размеру соматических клеток. Разумеется вся полученная информация сохраняется в памяти, может тут же выводиться на печать по средствам встроенного принтера, либо передана по Wi-fi или Bluetooth
